TIRF、共聚焦、FRET、光活化和顯微注射技術(shù)幫助科學(xué)家們克服了許多活細(xì)胞成像中的困難。所有技術(shù)的核心就是Ti,擁有這款強(qiáng)有力的新型倒置顯微鏡,您可以在尼康光學(xué)系統(tǒng)的幫助下輕松使用上述技術(shù)。Ti系列共有三種型號,改進(jìn)的系統(tǒng)速度,提升的靈活性和多模式特點(diǎn)使Ti成為用于研究和活細(xì)胞成像的理想系統(tǒng)。
高質(zhì)量相差圖像
尼康世界ling先的光學(xué)設(shè)計(jì)者開發(fā)了*的外部相差單元。使用這一革新系統(tǒng),將相差環(huán)整合至顯微鏡主體而不是物鏡里,使用者不必使用相差專用物鏡來觀察相差圖像,并可以通過高數(shù)值孔徑物鏡來得到高質(zhì)量圖像。另外使用不帶相差環(huán)的物鏡可以得到"全亮度"的熒光圖像。
置于顯微鏡主體內(nèi)的相差環(huán)
將原本置于相差物鏡中的相差環(huán)置于顯微鏡的主體的外部相差單元的光路設(shè)計(jì),便于使用者使用高數(shù)值孔徑物鏡得到高分辨率的相差圖像。根據(jù)所使用的物鏡,有四種類型的相差環(huán)可供選擇(Ti-E/U/S通用)。
超高分辨率
使用尼康的高性能物鏡,包括60x和100xTIRF物鏡,具有世界zui高1.49的數(shù)值孔徑,并且整合球差校正環(huán),可以得到其它標(biāo)準(zhǔn)相差物鏡無法比擬的高分辨率相差圖像。
使用同款物鏡得到的"全亮度"熒光圖像由于沒有相差環(huán)導(dǎo)致的光線損失,在同一系統(tǒng)中,不僅可以進(jìn)行相差觀察,還可以得到更明亮的"全亮度"熒光圖像、共聚焦圖像和TIRF圖像。
用水浸物鏡來觀察相差圖像
通過外部相差單元,即使使用水浸物鏡也可以得到清晰、高分辨率的相差圖像。
用于圖像分析的高分辨率圖像
由于相差圖像與TIRF觀察、DIC觀察可以使用同樣的物鏡,得到的圖像可用于高性數(shù)據(jù)處理和圖像分析,例如TIRF圖像的細(xì)胞輪廓定義。
多端口分層結(jié)構(gòu)支持研究
具有左端口、右端口和底*端口的多圖像端口設(shè)計(jì)可以在每個(gè)端口連接一個(gè)相機(jī)。另外分層結(jié)構(gòu)的擴(kuò)展空間設(shè)計(jì)可以加入一個(gè)后端口,這些特點(diǎn)方便用戶使用雙層熒光濾色塊盒和多相機(jī)進(jìn)行圖像獲取。 * Ti-E/B和Ti-U/B組合可選底端口
后端口確保多相機(jī)拍攝
使用可選的后端口設(shè)計(jì)擴(kuò)展了圖像獲取能力。與側(cè)端口結(jié)合使用可以用兩個(gè)相機(jī)獲取雙通道圖像。例如當(dāng)FRET (福斯特共振能量轉(zhuǎn)移)的熒光蛋白之間有觀察間隔、CFP和YFP的強(qiáng)度差別很大時(shí),可以通過調(diào)節(jié)單個(gè)相機(jī)的靈敏度來得到高信噪比圖像進(jìn)行比較。
分層結(jié)構(gòu)提高可擴(kuò)展性
Ti采用的分層結(jié)構(gòu)充分利用了無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)的優(yōu)勢,另外將PFS整合到物鏡轉(zhuǎn)換器??梢酝ㄟ^墊高塊在光路中引入PFS之外的兩個(gè)可選部件,利用該系統(tǒng)可以同時(shí)使用激光鑷、光活化單元和落射熒光裝置。每層的電動(dòng)熒光濾色塊盒可以單獨(dú)控制。
在更寬的波長范圍內(nèi)以更好的性能獲得多種熒光染料圖像
通過引入870nm的波長阻擋裝置,研究者可以使用包括Cy5.5在內(nèi)的近紅外熒光染料。從紫外到紅外范圍內(nèi)的光學(xué)特性得到提升,可用的物鏡數(shù)目增加,在大范圍的應(yīng)用中都可以實(shí)現(xiàn)焦點(diǎn)穩(wěn)定,不管是在紫外范圍的Ca濃度測量還是紅外范圍的激光鑷。
非凡的快速圖像獲取
對96孔板進(jìn)行三通道(雙通道熒光和相差)快速拍攝,速度提高2倍以上。
尼康獨(dú)有的調(diào)焦系統(tǒng)(PFS)排除焦點(diǎn)漂移
焦點(diǎn)漂移是時(shí)間序列觀察中zui大的障礙。尼康的PFS系統(tǒng)對長時(shí)間觀察過程中和加藥時(shí)可能出現(xiàn)的焦點(diǎn)漂移進(jìn)行校正。即使使用高倍物鏡或類似TIRF這樣的技術(shù)時(shí)也可以維持焦點(diǎn)。另外,在物鏡轉(zhuǎn)換器上整合PFS有助于節(jié)約空間,并不限制Ti的可擴(kuò)展分層結(jié)構(gòu)。 PFS采用光學(xué)補(bǔ)償系統(tǒng),對Z軸平面進(jìn)行實(shí)時(shí)校正。不需要使用PFS時(shí),也可以簡單地將其撤出光路。
數(shù)字控制集線器顯著提升了電動(dòng)附件的速度
尼康zui新研發(fā)的數(shù)字控制集線器通過減少部件之間的通訊時(shí)間,提高各附件的速度,進(jìn)而顯著提高整體的操作速度。 PC控制對Ti的電動(dòng)部件進(jìn)行優(yōu)化,縮短從動(dòng)作命令到移動(dòng)之間的反應(yīng)時(shí)間,從而對整體施行高速控制。 通過增加智能固件,電動(dòng)部件的整體操作時(shí)間顯著縮短,例如三通道(雙通道熒光和相差)連續(xù)圖像獲取需要的總時(shí)間大大縮短,減少了對細(xì)胞的光毒性。
高速電動(dòng)控制與圖像獲取
同步控制若干電動(dòng)部件,諸如物鏡轉(zhuǎn)換器、熒光濾色塊、光閘、聚光器轉(zhuǎn)換器和載物臺,研究者可以進(jìn)行多維電動(dòng)實(shí)驗(yàn)。更快的附件運(yùn)動(dòng)和圖像獲取縮短整體的曝光時(shí)間,減少相應(yīng)的光毒性,幫助研究者得到更有意義的數(shù)據(jù)。
提升每個(gè)電動(dòng)部件的速度
操作和/或轉(zhuǎn)換物鏡、濾光塊、XY載物臺、激發(fā)/阻擋濾光片的速度大幅增加,研究者可以專注于觀察和圖像獲取。新研發(fā)的控制器可以記錄和復(fù)制觀察條件,實(shí)現(xiàn)用鼠標(biāo)控制載物臺,整臺顯微鏡就像研究者眼睛和手的延伸部分。
每種觀察方法均采用優(yōu)化的光學(xué)技術(shù),得到圖像
尼康優(yōu)化的光學(xué)技術(shù)提供多種模式觀察標(biāo)本,向研究者呈現(xiàn)細(xì)胞的每一個(gè)細(xì)節(jié)。
Nomarski 微分干涉(DIC)
高對比度和高分辨率的平衡對于觀察細(xì)微結(jié)構(gòu)至關(guān)重要。尼康獨(dú)有的DIC系統(tǒng)即使在低放大倍率下也可以得到高分辨率圖像。新型DIC滑塊(干)提供高分辨率和高對比度兩種選擇。濾光塊型DIC檢偏器可以置于電動(dòng)濾光塊盒內(nèi),將DIC觀察和熒光觀察的切換時(shí)間顯著縮短。
相差
相差圖像觀察時(shí)可以使用CFI Plan Fluor ADH 100x (Oil)。該物鏡與傳統(tǒng)相差物鏡相比減少了相差圖像的光暈,增強(qiáng)了圖像的對比度。
暗場
使用高NA的聚光鏡可以進(jìn)行暗場觀察??梢詫ξ⒘W舆M(jìn)行長時(shí)間的觀察,并避免光漂白。
霍夫曼調(diào)制相差(HMC)®
HMC物鏡與HMC聚光鏡部件組合可以得到類似3D的高對比度、無光暈圖像,可以應(yīng)用于培養(yǎng)在塑料培養(yǎng)皿中的透明樣本。
為Ti系列研發(fā)的新型物鏡
CFI S Plan Fluor ELWD/ELWD相差物鏡
新研發(fā)的物鏡對近紫外(Ca2+)到近紅外波長范圍內(nèi)的光都有高通透性,并且改進(jìn)了色差校正。在多種照明模式下都可以得到高質(zhì)量無色差的圖像。
Plan Apochromat 20x物鏡
新型20x物鏡加入尼康專有的VC物鏡系列,該物鏡的軸向色差校正至405nm,是用于共聚焦觀察和光活化技術(shù)的理想物鏡。
提升可操作性
用于電動(dòng)操作的所有按鍵和控制轉(zhuǎn)換器設(shè)計(jì)都非常人性化,研究者可以不受到顯微鏡操作的影響,專注于研究。
操作按鍵位于顯微鏡主體的兩側(cè)和前面
熒光濾色塊的切換、物鏡轉(zhuǎn)換、Z軸粗/微調(diào)、PFS開/關(guān)控制、透射照明開/關(guān)控制都可以通過位于顯微鏡主體的按鍵進(jìn)行快速切換。
新研發(fā)的人機(jī)學(xué)控制器
通過手柄或人機(jī)學(xué)控制器可以控制高速電動(dòng)XY載物臺和Z軸。
顯微鏡主體前面的VFD屏幕和操作按鍵
包括物鏡信息在內(nèi)的顯微鏡狀態(tài)和PFS的開/關(guān)狀態(tài)都會顯示在VFD屏上。調(diào)。
PFS補(bǔ)償功能
PFS的補(bǔ)償功能易于控制,只需一個(gè)按鍵就可以切換粗/微調(diào)。
遠(yuǎn)程控制面板和預(yù)設(shè)按鍵
通過遠(yuǎn)程控制面板可以操作顯微鏡,并確認(rèn)顯微鏡目前的狀態(tài)。另外可以通過預(yù)設(shè)按鍵來自動(dòng)切換觀察條件。只需單單一個(gè)按鍵就可以完成從相差到熒光觀察的切換。
原創(chuàng)傾斜式設(shè)計(jì)
將顯微鏡主體的前部稍稍向后傾斜,操作者眼點(diǎn)與標(biāo)本之間的距離縮短了約40mm,增強(qiáng)了可操作性。